スギ花粉を高感度に検出
スギ花粉抗原 Cry j 1 ELISA Kit
製品の特長
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測定範囲は0.01~2.56 ng/mlと高感度
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反応時間(合計)2時間10分で測定
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花粉からのCry j 1抽出効率が高いExtraction bufferが付属
スギ花粉抗原・抗体試薬メーカーBDLだから実現できた,安価なスギ花粉抗原ELISAキットです。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
製品の内容
日本スギ(Cryptomeria japonica)花粉の主要アレルゲンの1つであるCry j 1の濃度をサンドイッチ法により測定するELISAキットです。
各社Cry j 1 ELISAキットとの比較
性能
測定範囲: 0.01~2.56 ng/ml
併行精度(日内変動): CV<10%
室内再現精度(日間変動): CV<10%
特異性: Cry j 1特異的に検出する。 ※ Cry j 2(10 ng/ml)に反応は見られなかった。
落下法により捕集した花粉の測定
空気中から自然落下するスギ花粉をシャーレで捕集(24時間)し,本製品またはA社ELISAキットを用いてCry j 1濃度の測定を試みた。
<結果>
本製品: 0.042 ng/ml (定量下限値: 0.01 ng/ml)
A社製品: 定量下限値未満のため測定不能 (定量下限値: 0.156 ng/ml)
本製品は測定感度が高いため,Cry j 1含有量が少ない試料からも測定を行うことができた。
<実験条件>
捕集日:2022年3月24日~25日
捕集方法:シャーレ(⌀90×15 mm)を設置し,24時間後に回収
設置場所:ベランダの床面(東京23区内)
抽出方法:回収したシャーレに直接,本製品付属のExtraction bufferを3 ml添加後,室温で30分撹拌し,全量回収した。回収後,さらにシャーレをExtraction buffer 2 mlで洗浄して回収した(計5 ml)。その後,3,000 rpmで15分間遠心分離し,上清を希釈せずに試料として用いた。
落下法により捕集した花粉の測定 Extraction buffer
本製品付属のExtraction buffer,または,A社キット付属の抽出バッファーでスギ花粉に対し抽出処理を行った。
各抽出物を本製品を用いて測定し,Cry j 1量を比較した。
<結果>
本製品付属のExtraction bufferでは約2.5倍Cryj1の抽出効率が高かった。
<実験条件>
抽出方法:スギ花粉20 mgを秤量後,本製品付属のExtraction bufferまたはA社Cry j 1 ELISAキット付属の抽出バッファーを400 μl添加し,室温で30分撹拌した。その後,10,000 rpmで15分間遠心分離し,上清を試料として用いた。
本製品で測定したCry j 1量と花粉飛散数の比較
下記の条件により落下法で捕集した大気中の花粉を本製品付属のExtraction Bufferで抽出し、Cry j 1量を測定した。また測定したCry j 1量の結果と、同時期に東京都福祉保健局が発表した飛散花粉数を比較した。
<結果>
本製品で測定したCry j 1量の変動は東京都発表の飛散花粉数の変動と同様の傾向を示した。
<実験条件>
・捕集日:2023年3月8~9日、3月15~16日、3月23~24日の計3回
・捕集方法:ワセリンを塗布したシャーレ(φ90×15 mm)を設置し、24時間後に回収
・設置場所:ベランダ(文京区)
・抽出方法:回収したシャーレに直接、本製品付属のExtraction Bufferを5 ml添加後、室温で30分撹拌し、全量回収した。回収後さらにシャーレをExtraction Buffer 5 mlで洗浄して回収した(計10 ml)。その後、3,000 rpmで15分間遠心分離し、上清を希釈せず原液で測定を行った。
・東京都福祉局発表の飛散花粉数:「東京都アレルギー情報navi. 」にて発表される「毎日のスギ花粉の観測値」(千代田区: https://www.fukushihoken.metro.tokyo.lg.jp/allergy/pollen/data/cedar.html)より引用
キット内容
保存温度: -20℃
Cry j 1 detection antibody
Cry j 1 standard solution
保存温度: 4℃
Dilution buffer
Antibody coated microplate for Cry j 1 (96 wells / 1枚)
Substrate solution(TMB)
Extraction buffer
Stop solution
Wash buffer(10×)
Plate seal (3枚)
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